基于肽暴露的生物傳感器顯示活細(xì)胞中單個(gè)分子的構(gòu)象

    近日，發(fā)表在《Cell》上的一項(xiàng)題為“Biosensors based on peptide exposure show single molecule conformations in live cells”的研究，證實(shí)了簡(jiǎn)單的熒光定位反映了蛋白質(zhì)的構(gòu)象。

    研究者描述了一種在活細(xì)胞中單粒子跟蹤(SPT)過(guò)程中研究單個(gè)蛋白質(zhì)構(gòu)象的方法。“結(jié)合劑/標(biāo)簽”是基于將7-mer多肽(標(biāo)簽)并入蛋白質(zhì)，其溶劑暴露受蛋白質(zhì)構(gòu)象控制。只有在暴露后，肽才能與報(bào)告蛋白(結(jié)合劑)特異性地相互作用。因此，簡(jiǎn)單的熒光定位反映了蛋白質(zhì)的構(gòu)象。通過(guò)直接激發(fā)明亮的染料，可以跟蹤單個(gè)蛋白質(zhì)的軌跡和構(gòu)象。簡(jiǎn)單的蛋白質(zhì)工程提供了高特異性的生物傳感器，適用于SPT和FRET。我們描述了tagSrc, tagFyn, tagSyk, tagFAK，以及正交結(jié)合劑/標(biāo)簽對(duì)。SPT顯示Src簇內(nèi)激活的Src島緩慢擴(kuò)散，黏附中激活的動(dòng)力學(xué)。定量分析和隨機(jī)建模揭示了體內(nèi)Src動(dòng)力學(xué)。結(jié)合劑/標(biāo)簽的簡(jiǎn)單性可以提供不同的蛋白質(zhì)。

論文鏈接：
https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0092867421011090
注：此研究成果摘自《Cell》期刊原文和期刊評(píng)論，文章內(nèi)容不代表本網(wǎng)站觀點(diǎn)和立場(chǎng)，僅供參考。