細(xì)胞外囊泡(Extracellular Vesicles, EVs)是指從細(xì)胞膜上脫落或者由細(xì)胞分泌的雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體,直徑從40nm到1000nm不等,能將mRNAs從供體細(xì)胞轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞,并直接調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的蛋白表達(dá)。細(xì)胞外囊泡中mRNA的分析為腫瘤的非侵襲性快速診斷提供了前所未有的機(jī)遇。
細(xì)胞外囊泡的mRNA含量極低且檢測(cè)程序復(fù)雜,國(guó)家納米科學(xué)中心研究團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)了一種原位檢測(cè)細(xì)胞外囊泡mRNA的方法,其結(jié)合了基于Förster共振能量轉(zhuǎn)移的脫氧核糖核酸四面體(FRET-based DNA tetrahedron,F(xiàn)DT),用于細(xì)胞外囊泡的有效內(nèi)化和靶基因檢測(cè),以及尺寸選擇性熱泳積累用于細(xì)胞外囊泡中Förster共振能量轉(zhuǎn)移(Förster resonance energy transfer ,F(xiàn)RET)信號(hào)的擴(kuò)增。這種基于脫氧核糖核酸四面體的熱泳試驗(yàn)(DNA tetrahedron-based thermophoretic assay,DTTA)通過(guò)提取核糖核酸和酶擴(kuò)增,檢測(cè)血清EVs中的前列腺特異性抗原(prostate specific antigen ,PSA)的檢測(cè)限為14 aM。DTTA顯示在前列腺癌和前列腺良性增生的鑒別上,細(xì)胞外囊泡 PSA mRNA優(yōu)于血清PSA蛋白(曲線下面積:0.93 vs 0.74;42例)。近日,研究團(tuán)隊(duì)將這項(xiàng)研究發(fā)表在《Nano Today》雜志上,題為《Ultrasensitive detection of mRNA in extracellular vesicles using DNA tetrahedron-based thermophoretic assay》。
這一項(xiàng)技術(shù)研究建立了一種超靈敏、快速、無(wú)酶的DTTA原位檢測(cè)細(xì)胞外囊泡PSA mRNA的方法,在鑒別前列腺癌和良性前列腺增生患者時(shí),用前列腺特異性抗原基因作為替代生物標(biāo)志物比血清前列腺特異性抗原蛋白具有更好的診斷準(zhǔn)確性,其可能會(huì)極大地?cái)U(kuò)展DNA納米結(jié)構(gòu)支持的液體活組織檢查的應(yīng)用。
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